Стероиды представляют собой небольшие и очень важные структурные или сигнальные молекулы, характеризующиеся сложным метаболизмом в живых организмах. Из-за разнообразия вовлеченных энзимов существует множество различных расстройств, связанных со стероидами.
Например, дефект отдельного фермента является довольно редким явлением, однако он может проявляться в различных клинических симптомах, и, таким образом, его становится очень сложно клинически диагностировать. Поэтому достоверное определение уровня гормонов по-прежнему представляет собой наиболее разумный подход в первоначальной диагностике и помогает избежать нелогичных и дорогостоящих методов молекулярной диагностики. Э тот анализ также является основой мониторинга таких сложных пациентов. В научных целях достоверное определение гормонов незаменимо для выяснения новых механизмов действия стероидных гормонов. Аналитические анализы стероидов очень сложны и никогда не следует их недооценивать.
Наиболее распространенные методы исследования стероидов традиционно включают в себя иммунологический анализ, а с недавнего времени еще и методы на основе масс-спектрометрии. Совершенно необходимо, чтобы врачи и ученые буквально наизусть знали методы исследования, которые они применяют.
С внедрением автоматизированных прямых анализов за последние два десятилетия в области иммунологических анализов стероидов наблюдалось снижение качества исследований. Целью данного обзора является удовлетворение потребности в более детальной информации и основательном ориентировании в области анализа стероидов.
В работе будут рассматриваться плюсы и минусы наиболее важных методов, таких как методы иммунологического анализа и масс-спектрометрии. Что касается последнего исследования, акцент будет сделан на газовой хроматографии/масс-спектрометрии (ГХ/МС), а также жидкостной хроматографии/масс-спектрометрия (ЖХ/МС).
Для наглядной иллюстрации содержания работы будут приведены отдельные части аналитического исследования нашей исследовательской группы DeutscheForschungsgemeinschaft FOR 1369 «Сульфатированные стероиды при репродукции». Одним словом, иммунологические анализы уже в течение долгого времени являются традиционным методом анализа стероидов. С ними легко работать.
Во время иммунологического анализа может быть исследован только один аналит (исследуемое вещество). Могут возникнуть проблемы со специфичностью, поэтому следует проявлять осторожность, особенно в отношении прямых анализов, характеризующихся недостатком этапов очистки. Методы, основанные на масс-спектрометрии, предоставляют информацию о структуре аналита и, следовательно, имеют более высокую специфичность.
В сочетании с хроматографическими методами они позволяют одновременно исследовать множество аналитов. Самая высокая специфичность может быть получена с использованием ГХ/МС, сложного, но наиболее мощного инструмента для характеристики метаболитов стероидных гормонов. ЖХ/МС — это точный метод исследования с высокой пропускной способностью, который очень хорошо подходит для обнаружения сложных стероидов. ГХ/МС и ЖХ/МС не являются конкурирующими методами, а дополняют друг друга.
Поскольку точное исследование стероидов требует чрезвычайно высокого опыта в области аналитики, а также в области биохимии стероидов, рекомендуется устанавливать сотрудничество и создавать коммуникационные сети с узкоспециализированными центрами экспертизы.
Авторы: S.A.WudyaG, Schulerb, A. Sánchez-Guijoa, M.F.Hartmanna
Журнал: Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology, Received 31 March 2017, Revised 18 July 2017, Accepted 5 September 2017, Available online 28 September 2017
